dsDNA:非洲猪瘟病毒科、痘病毒科、虹彩病毒科、腺病毒科、疱疹病毒目、多瘤病毒科(环)、乳头瘤病毒科(环)、线状病毒科(环)、杆状病毒科(环)、嗜肝病毒科(RT)
ssDNA:细小病毒科、圆环病毒科、细环病毒科
dsRNA:呼肠孤病毒科、双RNA病毒科、微双RNA病毒科
ssRNA(-):正黏病毒科、副黏病毒科、丝状病毒科、弹状病毒科、波纳病毒科、布尼亚病毒科、砂粒病毒科、逆转录病毒科(RT)
ssRNA(+):冠状病毒科、嵌杯病毒科、动脉炎病毒科、星状病毒科、披膜病毒科、微RNA病毒科、黄病毒科、戊肝病毒科、野田村病毒科
MOI:感染比、
dsDNA:
痘病毒科:
两个科:脊椎动物痘病毒亚科、昆虫痘病毒亚科
有交叉反应(禽类和哺乳类不交叉)
砖形(外层由管状物组成,芯髓哑铃样有侧体)
胞浆复制、伤口/昆虫叮咬感染
培养:鸡胚绒毛尿囊膜(粘液瘤痘斑小、分散独立、灰白色)(牛痘、痘苗病毒侵害血管,出血坏死性痘斑)
细胞培养(空斑):肾、胚胎、睾丸
腺病毒科:
不交叉
犬传染性肝炎病毒、减蛋综合症病毒(14-15日龄鸭胚尿囊膜)
分类:哺乳动物腺病毒、禽腺病毒属、富腺胸病毒属、唾液酸酶病毒属、鱼腺病毒属
感染性核酸、无囊膜、20面体、每个五邻体上有突出的纤丝、凝集红细胞
非洲猪瘟病毒科:
有囊膜、20面体、胞浆复制、血吸附、侵染淋巴细胞?、软蜱传播、无保护性抗原、持续感染
急性:发热、出血;亚急性:麻痹、消瘦
疱疹病毒目:
三个科:疱疹、异样疱疹、贝类
持续性感染
疱疹病毒科:亚科之间复制时间、潜伏位点、CPE不同
α亚科:单纯疱疹(带状疱疹)、水样疱疹(水痘)、马立克、传染性喉气管炎
β亚科:鼠巨化、象疱疹
γ亚科:恶性卡他热、奇蹄兽肉食兽病毒属
外界环境中不易存在,亲密接触传染,交配、舔等导致黏膜感染
生物学特性:潜伏感染、CPE、致肿瘤、种属内部交叉(火鸡疱疹预防马立克)
重要病毒:PRV(伪狂)、AILV(禽传染性喉气管炎)、MDV(马立克)、鸭瘟病毒、牛恶性卡他热病毒
PRV(伪狂犬病毒)
猪为原始宿主,可感染其他动物(犬),人有抗性
致病:
成年猪为隐性感染
繁殖障碍:怀孕母猪50%发生流产、死胎、木乃伊胎
仔猪:发热、神经症状、无母源抗体的新生仔猪死亡率%(免疫母猪)
特征症状:某部位奇痒
传播途径:食入污染饲料或死猪肉
诊断:ELISA、荧光抗体
预防:基因工程缺失疫苗、净化
AILV(禽传染性喉气管炎病毒)
所有年龄鸡均易感,4-18日龄多见
症状:咳嗽、气喘、流鼻涕、严重呼吸困难、伸颈探头、挤压,咳出血样粘液及白喉样病变(喉头干酪样坏死)
强毒发病率%,死亡率50-70%
传播途径:气雾及吸入
诊断:荧光抗体、PCR、鸡胚绒毛尿囊膜或气管培养
预防:肉鸡全进全出、种鸡及蛋鸡疫苗接种
MDV(马立克病毒)
三个血清型:1型马立克病毒、2型非致瘤毒株、3型HVT(火鸡疱疹)
细胞结合性疱疹病毒靶细胞为T淋巴细胞
4周龄鸡感染,2-5月龄鸡高发,死亡率80%
症状:神经淋巴瘤、导致麻痹;眼型、皮肤型
污染源:羽囊角化层的上皮细胞带毒
诊断:琼扩、免疫荧光
分离病毒:4日龄鸡胚卵黄囊/尿囊膜接种
预防:HVT免疫、1日龄鸡刺种、全进全出、抗病育种
鸭瘟病毒:
鸭疱疹病毒I型,以肠炎(香肠形)、脉管炎(局部肿胀)、广泛的局灶性坏死为主
宿主广泛?
ssDNA:
细小病毒科:
无囊膜、20面体、核内增殖且与细胞活力(周期、酶)有关、除鹅细小病毒与阿留申病毒外其他成员都有血凝性
CPV(犬细小):
病毒特性:有血凝性、抵抗力较强、存在普遍
分离病毒:犬肾原代细胞、CrFK、A72细胞
两个血清型:CPV-1和CPV-2,前者无明显致病性,后者常见
致病性:出血性肠炎为主(血痢、消瘦、毛无光泽)多发于幼犬。康复犬可产生高滴度抗体,幼犬可通过初乳和胎盘获得母源抗体
诊断:
细胞培养:核内包含体
血清学检查:HA-HI试验
PPV(猪细小):
病毒特性:有血凝性、抵抗力强、一个血清型、可在猪肾细胞中生长,产生明显细胞病变,出现核内包涵体
致病性:繁殖障碍,以初产母猪为主
诊断:细胞培养、血清学试验
GPV(鹅细小):
病毒特性:无血凝性,仅一个血清型。可在鹅胚成纤维细胞中生长,产生明显的细胞病变,出现核内包涵体,形成合胞体
致病性:雏鹅发病、引起小鹅瘟
诊断:细胞培养、血清学试验
(成鹅免疫,避开发病期)
圆环病毒科:
圆环病毒属:鸡贫血病毒、猪圆环病毒、鹦鹉喙羽病病毒
特征:无囊膜、20面体、核内复制
CAV基因有3个阅读框,编码结构蛋白,PCV4个阅读框,各编码主要衣壳蛋白
复制中间体有传染性(dsDNA)
环境中极其稳定,抗60度30min,PH3-9
CAV(鸡贫血病毒)
仅一个血清型、导致鸡传染性贫血、免疫抑制性疾病
特征:贫血、淋巴器官尤其胸腺萎缩、皮下和肌肉出血
PCV(猪圆环病毒):
两个血清型:PCV-1和PCV-2(靶器官广泛,可以说免疫抑制)
后者可导致PMWS断奶仔猪多系统衰竭综合症、PDNS肾病皮炎综合症
28天断奶、消瘦、被毛紊乱、皮炎
具有反转录过程的病毒
反转录病毒科:RNA病毒
嗜肝病毒科:DNA病毒,感染人
反转录病毒科:
甲型反转录病毒属:禽白血病病毒
乙型反转录病毒属:小鼠乳腺瘤病毒
丙型反转录病毒属:小鼠白血病病毒、猫白血病病毒
丁型反转录病毒属:牛白血病病毒
戊型反转录病毒属:大眼梭鲈皮肤肉瘤病毒
慢病毒属:人免疫缺陷病毒、马传染性贫血病毒
泡沫病毒属:牛泡沫病毒
反转录病毒科的特点:有囊膜、基因组为两条单股正链RNA组成的二聚体,均有gag、pol、env基因,引起细胞转化的肿瘤病毒有致癌基因v-onc,v-onc的存在常与env序列的缺失相伴随、病毒具有反转录酶
三层结构:
基因组-核蛋白复合体:螺旋对称
衣壳:20面体
囊膜:表面有糖蛋白突起(纤突)
禽白血病/肉瘤病毒
引起禽淋巴细胞增多症、成红细胞增多症、成髓细胞增多症、内皮瘤等,分A-J10个亚群。以垂直传播为主
EIAV(马传染性贫血病毒)
感染马属动物,出现以间歇热为主的贫血、出血、黄疸
补体结合试验和琼扩两种检测方法已被农业部纳入检疫规程
马传贫驴白细胞弱毒苗已有效控制了本病在我国的流行
dsRNA
呼肠孤病毒科、双RNA病毒科、微双RNA病毒科、单分病毒科(对虾,传染性肌坏死病毒)
呼肠孤病毒科:分节段
两个亚科:光滑呼肠孤病毒亚科、刺突呼肠孤病毒亚科
刺突:
正呼肠孤病毒属:哺乳动物的正呼肠孤病毒1-4型;禽正呼肠孤病毒有8个血清型
水生呼肠孤病毒属:草鱼出血病病毒
科州蜱传热病毒属:成员少
质型多角体病毒属、昆虫双链九片段RNA病毒属、昆虫非包裹呼肠孤病毒属
光滑:
环状病毒属:典型的虫媒病毒,蓝舌病毒、马脑炎病毒
轮状病毒属:A-E群,F、G暂定群。A群对人、牛及其他动物有致病性;B群仅对人致病;D群、F群对禽致病
东南亚十二节段病毒属、蟹十二节段病毒属
主要特性:无囊膜、近球形,三层衣壳、20面体、10个节段(正呼肠孤病毒属及环状病毒属)、11个节段(轮状及水生)、12个节段(科州蜱传热病毒属及东南亚、蟹十二节段病毒属)、胞浆内复制、某些成员具有血凝性、易发生基因重排(3-5%)无矫正功能
抵抗力:
正呼肠孤病毒、轮状病毒:强:(56度,PH3)
环状、科州蜱传热:弱
生物学特性:
环状、轮状:难于体外增殖
正呼肠孤病毒:胞浆内包涵体、细胞变圆
环状、科州传蜱:虫媒(蚊子、蜱)
抗原性:抗原性好、有交叉
诊断:实验动物增殖、IF、PAGE、RT-PCR、免疫电镜IEM
BTV(蓝舌病毒):虫媒
引致蓝舌病,绵羊主要传染病
特征:高热,口、鼻黏膜和胃肠道黏膜严重的卡他性炎症,绵羊舌部发绀故称蓝舌病。羔羊可引起腹泻。可感染牛和鹿
库蠓传播。夏季高发与昆虫活动季节相关
RNA有10个片段,可编码7种结构多肽(4种主要多肽,3种次要多肽)
VP7是群特异性抗原,补体结合试验、琼脂扩散试验或荧光抗体检验;
VP2是型特异性抗原,是中和位点及血凝素,凝集绵羊及人O型红细胞
OIE规定的通报疫病,国际通用检测方法为补体结合、荧光抗体或琼脂扩散试验
6日龄鸡胚卵黄囊接种:33.5度,4-8天死亡
脾脏接种乳鼠脑组织,敏感绵羊、PCR
预防:消灭库蠓、检测并淘汰急性发病期及患病毒血症的病畜,血清学阳性但无症状应隔离饲养,种畜应抗体与病毒分离均为阴性
可用灭活多价疫苗,或用DNA疫苗
轮状病毒
各种幼龄动物非细菌性腹泻的主要病原之一
病毒粒子呈圆形,具有双层衣壳。中央为一个电子致密的六角形核心,衣壳向外呈辐射状排列,构成内衣壳。外周为一层光滑薄膜构成的外衣壳。构成了特征性的轮状结构
基因组编码6个结构蛋白,VP7为中和抗原,决定病毒的血清型
微生物学诊断:
检测病毒颗粒或抗原:电镜、ELISA或乳胶凝集试验
分子生物学:PAGE(电泳型)、RT-PCR
双RNA病毒科:
禽双RNA病毒属:传染性囊病病毒IBDV
水生双RNA病毒属:鲑、鳟鱼的传染性胰腺坏死病毒等
昆虫双RNA病毒属
主要特性:无囊膜、单层外壳、20面体、基因组线性双股RNA,分A、B两个节段
编码4种结构蛋白和1种非结构蛋白
IBDV(传染性囊病病毒)
两个血清型:1型对鸡有致病性;2型未发现有致病性(利用病毒中和试验区分)
有超强毒株(vvIBDV)
法氏囊肿大出血、3天为死亡高峰期(之后就不死)
典型病变:对称性胸肌、大腿肌出血、腺、肌胃之间有出血带
实验宿主系统:鸡胚、细胞培养
致病性:3-6周龄的鸡最易感,损伤机体的免疫系统造成免疫抑制
诊断:FA、ELISA;鸡胚绒毛尿囊膜接种
疫苗:弱毒或灭活苗、母源抗体
ssRNA(-):
立目依据:有相似的基因结构及相同的基因次序、相似的基因表达与复制方式,螺旋对称核衣壳及RNA聚合酶,出芽方式成熟,有囊膜及囊膜粒,单分子负链单股RNA组成
副黏病毒科、弹状病毒科、丝状病毒科、波纳病毒科
副黏病毒科:
副黏病毒亚科:
呼吸道病毒属:牛副流感病毒3型、仙台病毒
腮腺炎病毒属:腮腺炎病毒、猪腮腺炎病毒(LPMV)、犬副流感病毒2型(SV5)
禽腮腺炎病毒属:NDV(禽副黏病毒1型)、禽副黏病毒2-9型
麻疹病毒属:牛瘟病毒、麻疹病毒、犬瘟热病毒、小反刍兽瘟病毒
亨尼病毒属:感染人
肺病毒亚科:
肺病毒属:牛呼吸道合胞病毒、小鼠肺炎病毒
伴肺病毒属:禽伴肺病毒(火鸡鼻气管炎病毒)、人伴肺病毒
副黏病毒科主要特性:
病毒颗粒球形或丝状,有囊膜及纤突,核衣壳螺旋对称
副黏病毒亚科编码7-9个蛋白:两种糖蛋白:F融合蛋白、HN血凝素神经氨酸酶
肺病毒亚科:9-11个蛋白,G蛋白相似HN,无神经氨酸酶活性
胞浆内复制,出芽方式成熟、形成合胞体、产生嗜酸性包涵体、血吸附
NDV(新城疫病毒)
又称亚洲鸡瘟,OIE通报疫病
分类地位:副黏病毒科,腮腺炎病毒属,单股RNA
形态大多为圆形,少数不规则为丝状,有囊膜,囊膜上有纤突,呈放射状排列,具有血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)活性
结构成分:L、HN、F、P、M
HN:具有血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)活性,构成病毒的大纤突
F蛋白:融合蛋白,构成病毒表面的小的纤突
L蛋白:为RNA依赖的RNA聚合酶,与核衣壳相连
NP:核衣壳蛋白
P:磷酸化核衣壳相联蛋白
M:基质蛋白连接、移位、序列保守
生物学活性:
血凝性:可凝集两栖类、爬行类、禽类、人、小鼠和豚鼠的红细胞(HN-HI)
神经氨酸酶活性:NA,洗脱+病毒与细胞膜的融合
细胞融合与溶血:病毒囊膜与细胞膜融合(两个或多个细胞);若红细胞则导致红细胞溶解
毒株分类:
速发型:嗜内脏型、神经型、肺型
中发型:疫苗毒株(I系)
缓发型:B1毒株(II系)、F毒株(III系)、Lasota系(IV系)
无症状病毒株
致病性试验:
确定NDV毒力的重要的有效的指标和手段
毒力指标:三类
MDT:最小致死量致死鸡胚的平均死亡时间。尿囊腔接种,60h内为速发型,60-90h为中发型,90h为缓发型
ICPI:一日龄雏鸡脑内接种的致病指数
IVPI:6周龄静脉接种的致病指数
病原性:除鸡外,火鸡、鹌鹑、鸽子、孔雀可引起轻度或致死性感染
鸭、鹅及多种野禽隐性带毒
人类感染后48小时,发生急性结膜炎
培养特性:
对各种组织有广泛亲嗜性,脑、肺、脾浓度高,骨髓中存活长
培养:鸡胚尿囊腔、细胞培养(原代细胞);传代细胞:Vero,BHK,Hela
临床症状:呼吸困难、下痢、神经机能紊乱、黏膜和浆膜出血;产蛋下降
精神萎靡、鸡冠暗红、嗉囊内充满液体内容物,口内流出酸臭液体、转圈(神经症状)、结膜炎、腺胃出血(腺胃乳头针尖状出血)、卵泡出血
微生物学诊断:
病料采集:脑、脾、血液、病鸡呼吸道分泌物
病料处理
病原分离:9-11日龄SPF鸡胚,尿囊腔接种
血清学试验:HI、ELISA、酶标/荧光技术
分子生物学技术:RT-PCR等
病毒特性鉴定:致病性试验,单克隆抗体技术
弹状病毒科:
分四个属:
狂犬病毒属
水疱病毒属:水疱性口炎印第安纳病毒、鲤春病毒血症病毒
暂时热病毒属:牛暂时热病毒
粒外弹状病毒属:鱼传染性造血器官坏死病毒、病毒性出血性败血症病毒
狂犬病病毒
主要特性:有囊膜、螺旋对称、病毒颗粒一端钝圆,一端平凹、呈子弹状、病毒表面有许多糖蛋白纤突,与病毒的感染和毒力有关、狂犬病病毒仅一种血清型,但其毒力可发生变异(囊膜糖蛋白抗原结构)、有血凝性、侵犯中枢神经细胞(主要在大脑海马回的锥体细胞中增殖)在胞浆中可形成嗜酸性包涵体,称为内基氏小体、抵抗力不强,对酸敏感,消毒药可用1%来苏儿
野毒株:从自然感染动物体内分离的致病力很强的病毒株称野毒株或街上毒株。
固定毒株:将野毒株在家兔脑内连续传代后,对家兔致病力增强,对人和其他动物致病力降低,称为固定毒株。独立相对稳定,可用作疫苗株。不易返强(需进行安全性评价)
在兔脑内接种一代后处理再接种兔脑连续传代本来对于兔无致病力适应后对家兔致病力增强对易感动物致病力减弱弱毒苗培育(接种非易感动物连续传代对非易感动物敏感性增强反而对原动物不敏感)
致病性:嗜神经性病毒,人兽共患病
主要在野生动物(狼、狐狸、鼬鼠、蝙蝠)及家养动物(狗、猫、马等)中传播发病后%致死
人主要被患病或带毒动物咬伤后感染
潜伏期1至数年不等与含毒量、伤口部位有关
致病机理P
微生物学诊断:
包涵体(内基氏小体)检查:取患病动物脑组织(海马角)作病理切片检查包涵体。
荧光抗体检查:将脑组织作成涂片或切片,与荧光标记抗狂犬病毒血清反应,检查抗原。
动物接种:用10%脑悬液或唾液注射乳鼠脑内,17天内出现神经症状,取脑组织检测内基小体。
病毒分离:乳鼠脑内接种10%病料乳剂。或接种鸡胚、鸭胚及多种细胞:BHK-21
防治原则:通报疫病发病上报疫情
扑杀野犬,加强家犬和家猫管理,要预防注射减毒活疫苗
伤口处理:人被疑似狂犬咬伤时,立即用肥皂水、0.1%新洁尔灭或清水反复冲洗伤口,再涂70%的酒精及碘酒。
使用人狂犬病免疫球蛋白(20IU/kg)或抗狂犬病马血清(40IU/kg)肌肉注射后10min遍布全身同时立即注射狂犬病疫苗
过去认为狗是狂犬病的唯一传染源。现在认为许多食肉动物通过相互间撕咬而传播病毒,如:狼、熊、蛇、兔、猫、鼠、蝙蝠、狐狸等
主要问题是家犬也可成为无症状携带者,据统计带毒率在8-25%之间,所以,表面“健康”的犬对人的健康危害也很大。
分节段负链RNA病毒
包括:
正黏病毒科:甲型流感病毒
布尼病毒科:多为虫媒病毒,如裂谷热病毒
砂粒病毒科:淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒
正黏病毒科:
分类:
甲型流感病毒属(A):马、猪、貂、禽、人
乙型流感病毒属(B):人、海豹
丙型流感病毒属(C):人、狗、猪可感染,不严重
索戈托病毒属:蜱为媒介的虫媒病毒,人和家畜
鲑传贫病毒属
形态结构:病毒颗粒多形性,多为球形、有囊膜和纤突(H和N),新分离株丝状多于球形、核衣壳螺旋对称、基因组为线状负链单股RNA
甲型与乙型基因组分8个节段、丙型7个节段、索戈托病毒6个节段、每个节段两端具有末端重复序列
纤突糖蛋白:两种(HA-NA),但丙型一种(血凝素-酯酶)
流感病毒的表面结构:
血凝素(HA):柱状,为三聚体,基本上以相同的间距覆盖了病毒的全部表面
神经氨酸酶(NA):蘑菇状,四个亚单位组成的四聚体,不平均分布在病毒表面,而是聚合成群
型与亚型的划分:
型:根据病毒核蛋白(NP)和膜蛋白(MP)抗原特性及基因特性的不同,分为A、B、C三型
亚型:血凝素(H)和神经氨酸酶(N)为分类指标
15个H型及9个N型
根据型别/病毒的宿主/地理来源/毒株序号/分离年代(亚型)命名
乙型、丙型至今未发现亚型
组合成的病原株:
H7N7,H3N8(马)
H1N1,H3N2(猪)
H7N7,H4N5(海豹)
H10N4(貂)
H1N1,H2N2,H3N2,H5N1,H3N8(人)
16个H与9个N的组合都在禽类主要是水禽(鸭、鹅)发现不一定发病但带毒遇易感动物即传染H5N2及H7N7,H5N1引起禽流感
流感病毒的抗原变异:
抗原漂移:编码HA或NA的基因发生点突变造成,变异幅度小,属量变,引起局部中、小型流行
抗原转换:因HA或NA的大幅度变异造成,属质变,导致新亚型的出现,引起世界性的暴发流行。
培养特性:可在鸡胚(尿囊腔或羊膜腔)和培养细胞(MDCK等)中增殖,但不引起明显的病变
抵抗力:不耐热,56度30分钟可灭活;对干燥,甲醛,乙醚等脂溶剂敏感有囊膜
微生物学检查:
病毒分离:取泄殖腔或鼻咽拭子,接种鸡胚或培养细胞
病料处理:加入无菌生理盐水/PBS防止干燥,加入双抗,震荡使吸附于棉签的病毒悬于液体,用镊子挤一下,过滤、离心
实质性脏器需研磨、反复冻融
血清学诊断:血凝抑制试验、中和试验、补体结合试验、酶免疫测定
抗原检测:直接从病人呼吸道分泌物、脱落细胞中检测抗原。琼扩(型/群特异性抗原)
分型鉴定:核酸杂交、PCR、序列分析
AIV(禽流感病毒):
水禽是流感病毒的“基因库”
高致病力的毒株引起发病,“真性鸡瘟”,即高致病性禽流感(HPAI),OIE规定的A类传染病,通报疫病
高致病力禽流感毒株:H7和H5亚型
感染人,直接或通过猪体混合重配
症状:H5N1,高致病力毒株引起突发性死亡,无可见症状,日龄大的鸡耐过,后表现产蛋下降、呼吸困难、腹泻、头部尤其鸡冠水肿
低致病力毒株(H9)引起产蛋下降、呼吸道症状及窦炎,火鸡严重
致病机理:毒力因子包括:HA、NA、NP,非结构蛋白NS1等
HA裂解为HA1和HA2,暴露出细胞结合位点,方有致病性
裂解位点的氨基酸序列在高、低致病力毒株间有差异
裂解、融合与毒株、组织及宿主种类有关
诊断:采样:泄殖腔或鼻咽拭子
病毒分离:8-10日龄鸡胚尿囊腔接种
HA-HI试验:取尿囊液
ELISA
亚型鉴定:国家级参考实验室进行
毒力测定:接种鸡
空斑试验:有毒株产生空斑,无毒株不产生
高致病力OIE规定标准:病毒原液作1:10稀释,静脉接种4-8周龄SPF鸡8只,0.2ml/只,观察10天,死亡大于等于6只即为高致病性毒株
预防与控制:国标:A类传染病,一旦发病立即通报
国内:防止病毒传入及蔓延
养殖场:防止毒株由野禽传染;有隔离设施阻挡野禽
灭活苗用于预防,H与N基因联合表达制成亚单位疫苗
流感用消炎药:感染后抵抗力下降,防止外界环境中的微生物等条件致病,防止继发感染
套式病毒目:
均采用套式系列的转录方式,即:基因表达通过一系列3’端相同的亚基因组mRNA完成3’端相同,终止位点不同
冠状病毒科、动脉炎病毒科、新科杆套病毒科
立目依据:结构及复制方式相同,编码RNA依赖的RNA聚合酶的基因序列相似
形态差异:动脉炎病毒科的为正20面体对称,纤突不明显
冠状病毒科核衣壳为螺旋对称,有纤突
冠状病毒科:
分类:冠状病毒属及凸隆病毒属
冠状病毒属:三个群
第一群:猪传染性胃肠炎病毒、猪呼吸道冠状病毒、猪流行性腹泻、犬冠状病毒、猫传染性腹膜炎病毒、猫肠道冠状病毒以及人冠状病毒E
第二群:小鼠肝炎病毒、牛冠状病毒、大鼠冠状病毒、猪血凝性脑脊髓炎病毒及人冠状病毒OC43、SARS冠状病毒针对我国
第三群:禽传染性支气管炎病毒及火鸡冠状病毒
主要特征:冠状病毒属为球状、凸隆病毒属为盘状/肾状或杆状
有囊膜、棒状纤突
核衣壳螺旋对称
冠状病毒属主要蛋白:
核衣壳蛋白
囊膜纤突蛋白:主要纤突糖蛋白、主要及次要嵌膜蛋白
第二群有血凝素脂酶(HE)处理后无血凝性
凸隆病毒属主要蛋白:
核衣壳蛋白
主要纤突糖蛋白、嵌膜蛋白(无次要嵌膜蛋白)
基因组为ssRNA(+),5’加帽,3’为多聚A尾,具有传染性
胞浆内复制,出芽进入内质网,胞吐释放
TGEV(猪传染性胃肠炎病毒)
四种可感染猪:猪血凝性脑脊髓炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪呼吸道冠状病毒(PRCV)
TGE:B类疫病;PRCV是TGEV的变异株,失去肠道嗜性,获得呼吸道嗜性
主要特征:属于冠状病毒科,是单股RNA病毒
有囊膜,病毒颗粒多呈球形,具多形性。
囊膜表面有明显的棘突,似皇冠状
病原性:各种年龄猪发生猪传染性胃肠炎
特征是呕吐胃和腹泻肠;2-3周龄以下的仔猪未断奶有较高死亡率脱水、消瘦;母猪可表现厌食,发热,腹泻及无乳
微生物学诊断:
细胞培养:采集空肠实质,处理后接种猪甲状腺原代细胞、猪甲状腺细胞株PD5或睾丸细胞。可产生CPE
动物试验:粪便或经空肠组织喂1周龄内仔猪
免疫学方法:早期仔猪黏膜作涂片或冰冻切片,荧光抗体或ELISA快速检测;中和试验或ELISA检测抗体
防治:
疫苗可用猪传染性胃肠炎弱毒疫苗。(母源抗体)主要为黏膜免疫(灭活苗效果差)
治疗可宰杀大猪取血清,用于注射小猪人工被动免疫
IBV(传染性支气管炎病毒)
基因组大、易变异,中和试验分8-10个血清型
临床病型:呼吸型、肾型、腺胃型胸肌小,严重萎缩、肠型等,互相间没有交叉性。
胰酶处理有血凝性
病毒粒子略呈圆形、有囊膜、外有许多梨状纤突,发射状排列。纤突易脱落
未经处理的病毒不凝集红细胞,1%胰蛋白酶处理3小时后可凝集鸡红细胞
可干扰鸡新城疫病毒的增殖;并被鸡脑脊髓炎病毒干扰在鸡胚中的增殖疫苗不能同时用弱毒苗,灭活可做二联苗
感染各日龄鸡,主要侵害1-4周龄鸡和幼鸡。对鸽、珍珠鸡及雉、火鸡有致病性
气喘、咳嗽及呼吸抑制等呼吸道症状
引起产蛋量和蛋品质下降畸形、软壳
接种鸡胚尿囊腔后,可致鸡胚死亡和矮小化侏儒
经鸡胚连续传代后病毒毒力会下降
NDV尿囊腔10日龄接种后一般13-14日龄收(尿囊液多、清亮)
传支接种后36-42小时之间收(白色浑浊)20天观察矮化情况(不长个)
诊断:
早期可取气管黏膜及其他组织、切片后作荧光染色
分离病毒:鸡胚尿囊腔接种,鸡胚侏儒
RT-PCR或cDNA探针
预防与控制:
建立无病鸡群
弱毒苗应用:饮水、气雾或点眼
灭活疫苗
动脉炎病毒科
动脉炎病毒属:
EAV(马动脉炎病毒)、PRRSV(猪繁殖与呼吸综合征病毒)、小鼠乳酸脱氢酶病毒、猴出血热病毒
PRRSV(猪繁殖与呼吸综合征病毒)
世界动物卫生组织将其列为法定报告动物疫病,中国列为二类动物疫病
欧洲型代表株:年猪肺泡巨噬细胞首次分离(Lelystad病毒)
美洲型代表株:年CL细胞分离(VR)
临床症状:厌食、发热、耳朵发绀(蓝耳病)30%
母猪怀孕天左右流产,有早产感染晚、产死胎、木乃伊胎感染早,存活的虚弱,呼吸困难,出生后1周内约50%会发生死亡
成年猪死亡率低
变异株的出现:NSP2基因存在部分缺失
我国现阶段流行的PRRSV都是属于美洲型毒株
“猪无名高热”
猪感染PRRSV后,出现免疫抑制、持续性感染和抗体依赖性增强作用(ADE)靶细胞为巨噬细胞(APC)导致其他疫苗失败
免疫抑制:感染后,病毒对巨噬细胞、单核细胞和小胶质细胞的某些亚群具有严格的细胞嗜性
造成多器官疾病:病毒血症、间质性肺炎、血管炎、淋巴结病、心肌炎和脑炎
显著增强对其他疾病的易感性,造成严重的继发感染
持续性感染:低水平的病毒复制,感染猪虽然产生免疫反应,但难以清除体内的全部病毒
带毒猪将病毒传播给阴性猪或垂直传播引起胎儿感染,从而造成猪群内PRRSV的长期存在,很难从猪场内清除
抗体依赖性增强作用(ADE):被动免疫的仔猪,中和抗体效价较高时具有保护作用
母源抗体水平下降到保护水平以下,PRRSV就会表现抗体依赖性增强作用,更增加了仔猪的易感性尽量不打疫苗
PRRSV疫苗免疫诱导产生的抗体对强毒株的感染也具有抗体依赖增强作用
临床上会见到疫苗免疫后反而使病情加剧的现象,这给疫苗的应用带来不良的后果
诊断:分离病毒:肺脏、脾、淋巴结、血液等,用猪肺泡巨噬细胞、VeroMA-及Marc-细胞
中和试验、ELISA、RT-PCR
预防:灭活苗、弱毒苗易返强、种猪加强检疫,建立无病猪场
微RNA病毒目
微RNA病毒科和双顺反子病毒科
共同特点:单股正链RNA基因组、自动水解加工的多聚蛋白、解旋酶-蛋白酶-依赖RNA聚合酶、三域复制区域、病毒颗粒20面体无囊膜
微RNA病毒科
由12个属组成:口蹄疫病毒属、肠病毒属、心病毒属、肝病毒属、副肠孤病毒属、马鼻病毒属、捷申病毒属、嵴病毒属、鼻病毒属、猴禽猪肠病毒属、塞内卡病毒属、震颤病毒属、禽肝炎病毒属
主要特性:形态结构:20面体对称、呈球形、无囊膜
衣壳由60个亚单位组成,每个亚单位含4种衣壳蛋白VP1、VP2、VP3、VP4;基因组结合蛋白VPg
基因组:ssRNA(+),3’端为PolyA尾,5’端有VPg蛋白与之共价结合,基因组RNA有感染性
只有一个大的ORF(开放阅读框)翻译成多聚蛋白前体裂解为不同蛋白、胞浆内复制
抗性较强(肠、肝、捷申病毒耐56度,PH3;心、鼻病毒抗性较弱)
抗原性较好、无交叉反应
诊断:免疫荧光、ELISA
肠病毒属(SVD)与口蹄疫(FMD)具有相似症状
肝病毒属:黄疸
FMDV(口蹄疫病毒)A类传染病
主要特性:属于微RNA病毒科,单股RNA病毒、20面体对称,外表光滑,近似球形,无囊膜
有7个血清型:O型、A型、C型、南非1型(SAT1)、南非2型(SAT2)、南非3型(SAT3)、亚洲1型(Asia1)。共60多个亚型
不同血清型间无交叉免疫,同型不同亚型间有部分交叉免疫
病毒易变异
病毒在家畜分泌物和畜产品中可存活较长时间。50度加热可灭活病毒,对脂溶剂有抵抗力,对PH大于11和PH小于6.5敏感。消毒药常用1%烧碱
致病性:可引起偶蹄动物(牛、猪、羊)的自然感染与手足口不同,人感染不严重
表现:口腔黏膜、舌、蹄部、乳房发生特异性水疱,进一步破溃、糜烂。猪-跛行
感染率高,死亡率低。怀孕母猪可能发生流产
幼小动物因心肌炎死亡率高虎斑心
实验室诊断:病料分离:采集水疱皮、淋巴结(置于1:5-%甘油缓冲液中,研磨、反复冻融、离心、取上清、加双抗、过滤)、水疱液。病毒血症时期的血液和组织。-20度冰箱
家畜的分泌物和排泄物均带毒,病毒以舌面水疱皮排出最多,病猪以破溃的蹄皮最多,精液可带毒。
空气是一种重要的传播媒介,可发生长距离跳跃式传播。
动物接种:7-9日龄乳鼠死亡、豚鼠发病
水泡病毒用1-3日龄乳鼠死亡,7-9日龄不死亡
细胞培养:牛源或羊源细胞,BHK-21
血清学试验:ELISA(数小时可出结果)
间接夹心法检测抗原-捕捉法
液相阻断ELISA检测抗体
中和试验
补体结合试验(判定血清型)
3ABC抗体:非结构蛋白抗体区分野毒和疫苗
防治:发病动物焚烧、深埋
检疫和免疫接种:O型和A型口蹄疫灭活疫苗(内地)
O型和A型口蹄疫鼠化弱毒疫苗(边境地区)建立防疫带
SVDV(猪水泡病毒)P
伤口、消化道
与口蹄疫相似,但在家畜中仅感染猪
区别:SVDV属肠病毒属;FMDV属口蹄疫病毒属
FMDV1-3、7-9日龄乳鼠均死亡;SVDV7-9日龄不死亡
PH:SVDV抗酸,可处理至PH=3再接种
AEV(禽脑脊髓炎病毒)
同义名:流行性震颤病毒
肠病毒属,只有一个血清型
致病性:感染宿主范围:1-3周龄雏鸡,火鸡,鹌鹑和雉鸡。可垂直和水平传播
实验:鸡胚卵黄囊接种、鸡胚成纤维细胞等
实验室诊断:取病鸡脑组织匀浆接种鸡胚,孵化后在10天内可出现神经症状
免疫荧光法检查病鸡组织中的病毒抗原
病毒中和试验、ELISA检查血清
其他正链RNA病毒P
杯状病毒科、戊肝病毒科、星状病毒科、披膜病毒科、黄病毒科、野田村病毒科
黄病毒科
分类:黄病毒属:69种多,有人畜共患病原,虫媒病毒(蚊、蜱)
蜱传、跳跃病、黄热病、登革热、乙脑、出血热
西尼罗河病毒(蚊、人、马、鸟)
瘟病毒属:主要包括猪瘟病毒、牛病毒性腹泻病毒1/2型、边区病病毒羊;关系密切,有交叉抗原反应
典型猪瘟:高发病率高致死率
丙肝病毒属:人的丙型肝炎病毒与庚型肝炎病毒
病毒主要特性:黄病毒属成员大部分为虫媒病毒
球形,有类脂囊膜、核衣壳20面体对称、基因组单股正链RNA
病毒基因组含一个开放阅读框
病毒RNA有感染性
黄病毒属成员可在许多肾细胞系增殖,有明显CPE
瘟病毒可在原代肾细胞生长,但是不产生CPE
猪瘟病毒:急性(出血);慢性(纽扣状坏死)
牛病毒性腹泻与猪瘟有交叉、免疫抑制、免疫耐受、胎儿小脑发育不全
羊边界病:骨骼肌特征性震颤“摇摆病”“舞蹈症”
中枢神经系统髓鞘质生成缺陷、初生羔羊被毛细长绒毛状、生长迟滞、常死亡、配种后常流产或产出病羔
CSFV(猪瘟病毒)典型猪瘟
非洲猪瘟为ASFV(区别:分类地位、虫媒、核酸、细胞适应性)
猪瘟的病原,各种年龄的猪均发病
症状:急性、热性传染病,高热、厌食、委顿及结膜炎
病变:全身性出血、坏死和梗塞
病毒主要特性:形态近圆、基因组为单链正股RNA
外界抵抗力:较强,72-76度1小时;1-2%苛性钠或石灰水15-60分钟;2.5%甲醛14小时才杀死0.4%用于灭活苗;PH4-10环境稳定
抗原性:只有1个血清型,但毒力有很大差异
中和试验将毒株分为两群:
H群:致病性强,与牛无交叉保护
B群:弱,慢性经过,与牛黏膜病病毒有交叉保护
致病性:强毒引起典型猪瘟
毒力减弱的毒株感染怀孕母猪导致死胎、流产、木乃伊胎或死产,所产仔猪不死者产生免疫耐受,表现为颤抖、矮小并终身排毒,造成持续性传染
培养:乳猪脾、肾、骨髓、淋巴细胞、睾丸等均可,不产生CPE或细胞病变轻微
家兔经静脉接种此病毒,交替通过猪体、兔体传代,再经猪体传代,逐渐失去对猪的致病力:猪瘟兔化弱毒株
END试验(新城疫病毒强化试验):CSFV、NDV均不引起猪睾丸细胞产生CPE,先接种猪瘟病毒,3天后接NDV,有明显的CPE,NDV滴度升高。可检测猪瘟野毒株。对兔化弱毒株无效
此现象可用猪瘟抗血清抑制
诊断:病料采集:取高热期血液、淋巴结、脾和扁桃体,慢性可采集流产胎儿和死产猪的脏器
病毒的分离鉴定:接种于细胞,如原代猪肾细胞、睾丸细胞,PK15等
荧光抗体技术查抗原
END试验
捕捉ELISA
免疫组化技术
血凝增加病变抑制试验(HEIC):猪肾细胞,不出现病变,接NDV后仍没有病变,但HA滴度增加
病毒干扰试验:猪瘟病毒与口蹄疫病毒之间出现干扰现象,猪瘟病毒在猪肾细胞中不出现CPE,可产生干扰素,再接种口蹄疫病毒时,可干扰其复制并抑制CPE出现
防治:耐过,免疫力强
被动免疫
主动免疫:弱毒活疫苗—猪瘟兔化弱毒株(C株),由中国兽药监察所鉴定、保管、供应
细胞源活疫苗
兔源活疫苗:猪瘟乳兔组织活疫苗、脾淋苗
阮病毒
症状:精神异常:神经质、焦虑不安、恐惧、神志恍惚、烦躁不安
运动障碍:共济失调、四肢伸展过度、后肢运动失调,震颤易跌倒、麻痹、起立困难、不能站立
感觉异常:对触摸和声音过度敏感,挤奶时奶牛乱踢乱蹬“疯牛病”
疯牛病有可能传染给人类:
通过牛肉及牛肉制品,如用牛脑匀浆做粘合剂生产的汉堡包、香肠、酥饼等
通过以动物源性原料成分生产的化妆品,如牛或羊胎盘提取物、羊毛脂等
导致人变异型克雅氏病(vCJD)
特征:脑组织形成广泛神经元细胞空泡化,脑组织和脊髓呈现海绵状病变,有典型的淀粉样斑块堆积
该病理变化不累及其他器官
脑组织和脊髓呈海绵状病变(传染性海绵状脑病TSEs)
绵羊痒病:“羊瘙痒症”其症状表现为:丧失协调性、站立不稳、烦躁不安、奇痒难熬,直至瘫痪死亡
牛传染性海绵状脑病BSE
传染性水貂脑病
以下感染人:
克雅氏综合症(又称为早老年痴呆症,CJD)
格斯特曼综合症,GSS
库鲁病(又称为震颤病,Kuru)
致死性家族失眠症,FFI
病原体的发现:
抽取患病动物脑组织或脊髓液接种健康动物,健康动物发病
未滤过的神经组织和滤过液都可以使健康动物感染该病——非细菌类微生物
加热或用福尔马林处理过滤液使“病毒”的DNA或RNA变性,但处理后的滤过液仍然具有感染性——不含有核酸成分或其致病性与其是否有核酸无关
在感染组织或纯化的病料中没有可见的病毒粒子——病毒的感染性仅与其含有的蛋白成分有关
病原体是一类没有核酸(即使有也非常小)只有蛋白质成分的“病毒”(朊病毒、蛋白侵染颗粒、朊粒、普里昂蛋白)
痒病相关纤维(SAF)
致病机理:哺乳动物基因组可编码一种正常细胞蛋白,称为朊蛋白(PrPc)
PrPc存在一个同源异构体,即PrPsc(致病性朊蛋白或朊病毒)
PrPc仅存在α螺旋,而PrPsc有多个β折叠存在
PrPsc进入机体后,形成PrPc-PrPsc二聚体,转变成PrPsc。需要伴侣蛋白参与。PrPsc在脑组织中大量堆积,形成SAF,成为形成淀粉样斑块的前体,进一步聚合形成淀粉样斑块,最后发展形成神经元空斑(PrP斑)
经基因敲除小鼠初步证实
疾病的发生是由于机体正常细胞PrPc转化为异构体PrPsc,由α-螺旋结构转变为β-折叠,发生构象变化引起的。
免疫反应:无炎症反应、不产生干扰素、无体液免疫、无细胞免疫
微生物学诊断方法:
临床症状:共济失调,震颤等
遗传背景:痒病,克雅氏综合症,致死性家族失眠症
脑组织病理学检查:淀粉样斑块,神经元空斑
免疫学方法(特异性抗体):包括免疫组化,免疫印迹,双抗体夹心ELISA等
小结
形状:痘病毒砖形、ssRNA(-)螺旋对称(副黏病毒)、狂犬螺旋对称、正黏病毒螺旋对称、冠状病毒螺旋对称
囊膜纤突:腺病毒无囊膜有纤丝、疱疹病毒有囊膜、非洲猪瘟有囊膜、反转录病毒有囊膜有纤突、ssRNA有囊膜及膜粒(副黏病毒有囊膜及纤突NDV、狂犬有囊膜有纤突、正黏病毒有囊膜和纤突、套式病毒目有纤突(冠状病毒科TGEV、IBV纤突易脱落;动脉炎病毒科PRRSV)、黄病毒属有囊膜
血凝性:腺病毒、非洲猪瘟(血吸附)、细小病毒(CPV、PPV)、呼肠孤病毒(BTV)、副黏病毒(NDV)、狂犬、正黏病毒、冠状病毒(IBV胰酶处理
抗原交叉:痘病毒、疱疹病毒、呼肠孤病毒、黄病毒科瘟病毒属(牛病毒性腹泻与猪瘟)
虫媒:痘病毒、非洲猪瘟软蜱传播、呼肠孤病毒(环状病毒BTV库蠓传播、科州传蜱)、黄病毒属、布尼病毒科、正黏病毒科索戈托病毒属
持续性感染/潜伏感染/隐性感染:非洲猪瘟、疱疹病毒(PRV)、NDV(野禽)、PRRSV、CSFV
分节段:呼肠孤病毒科、双RNA病毒科、正黏病毒
传染性核酸:圆环病毒(dsDNA)、凸隆病毒属、黄病毒属
繁殖障碍:PRV、PPV、PRRSV、FMDV、CSFV、乙脑
致肿瘤:疱疹病毒、禽白血病/肉瘤病毒
产蛋下降:减蛋综合症、NDV、AIV、IBV
禽类病毒:减蛋综合症、AILV、CAV、禽白血病/肉瘤病毒、IBDV、NDV、AIV、IBV、AEV
消化系统:CPV(出血性肠炎)、BTV(黏膜卡他性炎症)、轮状病毒、NDV、AIV、TGEV
呼吸系统:AILV、NDV、AIV、IBV
免疫抑制:非洲猪瘟(侵染淋巴细胞)、MDV(T淋巴)、CAV(胸腺萎缩)、PCV(靶器官广泛)、IBDV(法氏囊)、PRRSV(巨噬细胞)
垂直传播:禽白血病/肉瘤病毒、PRRSV、FMDV(精液带毒)
OIE通报:BTV补体结合、荧光抗体、琼扩;NDV;AIV病毒液1:10稀释静脉注射;FMDV;狂犬
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