从目前我国流行非洲猪瘟趋势上来看,以后非洲猪瘟在我国会存在相当长的一段时间,那么在非洲猪瘟长期存在的情况下,减少猪群疫苗免疫次数,减少疫苗接种后对猪群带来的应激是一个趋势,对于猪群来说猪瘟疫苗和伪狂犬疫苗是最为基础也是最为重要的疫苗。由于仔猪和母猪的猪瘟和伪狂犬疫苗的免疫程序相似(包括伪狂犬的1-3天的滴鼻免疫和猪瘟的超前免疫),免疫次数大体一致,疫苗生产工艺和免疫效果评价都很成熟,基于以上原因,我们建议在猪瘟疫苗和伪狂犬疫苗进行同时混合接种,这样减少免疫次数同时减少接种疫苗对猪群造成的应激。
1、试验材料与方法
1.1试验用品
猪瘟抗体检测试剂盒、伪狂犬gB、伪狂犬gE检测试剂盒购自IDEXX公司。
猪瘟疫苗20头份;伪狂犬疫苗20头份;稀释液,以上为哈药疫苗公司提供的高端蓝瓶产品;
国内某公司猪瘟疫苗20头份;国内某公司伪狂犬疫苗20头份均在正规兽药市场采购。
1.2试验动物
90头1日龄仔猪,分为三组,每组30头,黑龙江某规模化猪场。
1.3试验分组与疫苗接种
A组(国内某厂家)
B组(哈药疫苗)
C组(单独免疫组)
1日龄
滴鼻伪狂犬疫苗0.5头份
滴鼻伪狂犬疫苗0.5头份
猪瘟与伪狂犬疫苗单独免疫组(猪瘟和伪狂犬疫苗由我公司提供),具体免疫时间按试验猪场免疫程序进行。
35日龄
猪瘟与伪狂犬疫苗各1头份
猪瘟与伪狂犬疫苗各1头份
70日龄
猪瘟与伪狂犬疫苗各1头份
猪瘟与伪狂犬疫苗各1头份
1.4免疫剂量
猪瘟与伪狂犬各1头份,每头份用1毫升专用稀释液进行稀释,联合免疫时,每头猪接种2ml。
1.5母源抗体检测
检测母猪猪瘟与伪狂犬抗体水平,挑选出仔猪猪瘟和伪狂犬母源抗体在同一水平线上的猪群,进行试验,这样主要是为了避免母源抗体不整齐影响试验效果。根据仔猪试验数量和母猪产子数量,对20头母猪进行抗体检测。
1.6抗体检测
三个试验组,每组在不同日龄分别检测20头猪血清,分别在35、70、、、日龄进行采血,每个组别分别采集20头猪血液,分离血清,检测猪瘟和伪狂犬抗体滴度。猪瘟疫苗抗体和伪狂犬疫苗抗体的→检测应用猪瘟抗体检测试剂盒、伪狂犬gB、伪狂犬gE检测试剂盒参照IDEXX公司的试剂盒说明书检测猪瘟和伪狂犬抗体。
1.7体温测定
疫苗接种后分别在1h﹑2h﹑4h﹑8h﹑12h﹑24h对三个组别猪群进行体温测定。
1.8应激反应观察
三组猪群(每组20头)疫苗接种后,在2小时内通过猪群的精神状态﹑呕吐﹑发热﹑抽搐﹑死亡等症状观察猪群的整体状态,并记录。
2试验结果
2.1母源抗体效价结果
项目
母猪(母源抗体平均值)
猪瘟
89.08%
伪狂犬(gE)
1.
伪狂犬(gB)
0.
2.2猪瘟抗体效价检测结果(阻断率%平均值)
日龄(d)
A组
B组
C组
35
66.58
67.12
67.68
70
55.45
55.13
56.35
89.78
90.04
89.54
84.78
85.35
85.69
82.54
82.89
83.76
在35日龄和70日龄两次对猪群进行猪瘟和伪狂犬疫苗联合免疫后,70日龄后猪瘟阻断率在55%以上。A﹑B﹑C三组之间并无明显差异,保护期能维持日龄。
2.3猪瘟抗体阳性率检测结果(阳性率%平均值)
日龄(d)
A组
B组
C组
35
70
70
75
70
50
55
50
90
90
90
85
85
85
80
80
80
在35日龄和70日龄两次对猪群进行猪瘟和伪狂犬疫苗联合免疫后,日龄后猪瘟阳性率在80%以上。A﹑B﹑C三组之间并无明显差异,说明联合免疫疫苗对猪群猪瘟有很好的保护率。
2.4伪狂犬gE抗体效价检测结果(S/N值平均值)
日龄(d)
A组
B组
C组
35
1.
1.
1.
70
1.
0.
0.
1.
1.
1.
1.
1.
1.
1.
1.
1.
在35日龄和70日龄两次对猪群进行猪瘟和伪狂犬疫苗联合免疫后,70日龄后伪狂犬gE均为阴性,说明猪群没有伪狂犬野毒感染。A﹑B﹑C三组之间并无明显差异,保护期能维持日龄。
2.5伪狂犬gB抗体效价检测结果(S/N值平均值)
日龄(d)
A组
B组
C组
35
0.
0.
0.
70
0.
0.
0.
0.
0.
0.
0.3
0.
0.
0.
0.2
0.
在35日龄和70日龄两次对猪群进行猪瘟和伪狂犬疫苗联合免疫后,70日龄后伪狂犬gB均为阴性,说明伪狂犬疫苗在猪群中产生较高的保护率。B组要略好于A组和C组,A﹑B﹑C三组之间并无明显差异,保护期能维持日龄。
2.6猪群免疫后体温平均值测定结果(℃)
时间(h)
A组
B组
C组
1
38.9
39
38.8
2
39.3
38.9
39.1
4
39.1
38.8
38.9
8
38.6
39.3
39.2
12
39.2
38.9
39.5
24
39
39.1
38.9
疫苗联合使用后在疫苗接种后1﹑2﹑4﹑8﹑12﹑24h监测猪群体温,A﹑B﹑C三组猪群体温正常。
2.6猪群应激反应观察
精神沉郁
呕吐
发热
抽搐
死亡
A组(20)
1/20
0/20
2/20
0/20
0/20
B组(20)
1/20
0/20
1/20
0/20
0/20
C组(20)
1/20
0/20
1/20
0/20
0/20
三组别接种疫苗后,通过猪群的精神状态﹑呕吐﹑发热﹑抽搐﹑死亡等症状观察2两小时,猪群整体状况良好。
3讨论
3.1母源抗体检测
本试验在进行联合免疫前,对分娩母猪在产前进行猪瘟和伪狂犬母源抗体测定,确定母源抗体水平,同时挑选出母源抗体水平相对一致的母猪,进行后续仔猪联合免疫试验,以确保本试验整体效果。本试验所选取的10头母猪的猪瘟抗体值和伪狂犬抗体值相近,猪瘟阻断率是89.08%,伪狂犬(gE)为1.,伪狂犬(gB)为0.,说明母猪的猪瘟和伪狂犬抗体水平都很好,相对仔猪也有较好的保护力。
3.2日龄选择
接种日龄是根据目前常规免疫程序制定,猪瘟和伪狂犬接种均为三次免疫。猪瘟1日龄免疫属于超前免疫,在现地免疫中,可以不进行接种,本试验主要是为了与猪瘟伪狂犬联合疫苗进行对比,由于在临床上1日龄接种猪瘟疫苗较少,本试验在1日龄免疫程序中,不接种猪瘟疫苗。
3.3免疫剂量选择
本次试验猪瘟和伪狂犬疫苗都选择最小接种剂量,猪瘟和伪狂犬联合疫苗也选择最小剂量,接种剂量相同,我们就可以在同等水平下对比免疫效果。在临床上一般使用剂量会大一些,但是这并不影响我们本次试验的对比结果。
3.5伪狂犬抗体滴度分析
伪狂犬是在1日龄进行滴鼻免疫,35日龄和70日龄联合免疫,从35日龄﹑70日龄﹑日龄﹑日龄﹑检测果果说明,A﹑B﹑C三组伪狂犬gE均为阴性,伪狂犬gB均为阳性,A组和B组与对照组C组相比较伪狂犬gE值无显著差异。A组和B组与对照组C组相比较伪狂犬gB值无显著差异,但相对比较B组伪狂犬gB值要略低于A组和对照组C组,说明B组伪狂犬疫苗保护率要好于A组和对照组C组,但是无明显显著差异。
3.6猪群体温测定结果分析
本试验猪瘟和伪狂犬联合免疫主要从两个方面说明本试验是否可以进行,第一点是联合免疫疫苗使用后对猪群的保护率情况,第二点是联合疫苗疫苗是否对猪群有应激反应。本试验在联合疫苗接种后的1﹑2﹑4﹑8﹑12﹑24h进行体温测定,同时观察猪群精神状态,A﹑B﹑C三组猪群体温正常,精神状态正常,猪群并无应激反应症状。
4结论
本试验通过猪瘟和伪狂犬疫苗联合免疫,选取两个厂家的疫苗进行联合免疫,对单独猪瘟和伪狂犬疫苗免疫进行对比,从检测猪瘟阻断率和伪狂犬gE和gB值判断联合免疫疫苗对猪群的保护率情况,从检测结果看,A组和B组疫苗联合免疫使用与C组单独疫苗免疫所产生的猪瘟抗体值和伪狂犬抗体值并无明显差异,差异不显著,而且对猪群都能产生较高的保护率,来预防猪群猪瘟和伪狂犬疫病的发生。
本试验通过疫苗接种后在不同时间点测定猪群体温并且同时观察猪群的精神状态,以此判断猪瘟和伪狂犬疫苗联合使用是否对猪群产生应激反应,结果表明试验A组﹑B组和对照组C组猪群体温正常,精神状态正常,三组猪群无不良反应,说明猪瘟和伪狂犬疫苗联合免疫对猪群无应激反应,安全。
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